Responsabile Dr Ernesto Vigna

La Mission del Laboratorio è quella di offrire prestazioni di alta specializzazione, rivolte alla diagnosi e monitoraggio delle anemie, leucemie acute, leucemia mieloide cronica, leucemia linfoblastica acuta, sindromi mielodisplastiche, sindromi mieloproliferative, linfomi e mieloma multiplo.
Il laboratorio partecipa a controlli di qualità per il monitoraggio del malattia minima residua della leucemia mieloide cronica (LMC) e dello stato mutazionale del gene JAK2, per le patologie mieloproliferative.

Sezione di citomorfologia

Tecniche

• Emocitometria automatizzata
• Colorazioni citochimiche su strisci di sangue periferico e midollare e su citocentrifugati di liquido cefalo-rachidiano/versamenti
• Analisi nefelometrica su siero ed urine

Attività diagnostica

• Formula leucocitaria manuale microscopica.
• Lettura e refertazione di preparati citologici di sangue periferico ed aspirati midollari e di citocentrifugati per la diagnostica ed il monitoraggio citomorfologico di patologie ematologiche oncologiche e non.
• Conteggio piastrinico manuale microscopico.

Sezione di citofluorimetria

Nel settore di citofluorimetria si esegue lo studio dei fenotipi immunologici associati ai disordini ematologici, grazie all'ausilio di anticorpi monoclonali altamente specifici ,marcati con diversi fluorocromi, la successiva lettura degli stessi al citofluorimetro che permette la caratterizzazione specifica delle malattie ematologiche, il followup della terapia, e infine la valutazione della malattia minima residua.

Caratterizzazione citometrica delle emopatie maligne su:

• Sangue periferico
• Aspirato midollare
• Liquido cefalorachidiano
• Liquido pleurico
• Liquido ascitico
• Tecniche
• Citometria a flusso a 8 colori
• Nefelometria

Attività diagnostica

• Studio delle sottopopolazioni linfocitarie
• Studi di cellule staminali circolanti
• Immunofenotipo leucemia mieloide acuta - diagnosi
• Immunofenotipo leucemia mieloide acuta – malattia minima residua
• Immunofenotipo leucemia linfoblastica acuta - diagnosi
• Immunofenotipo leucemia linfoblastica acuta – malattia minima residua
• Immunofenotipo sindrome mielodisplastica – diagnosi
• Immunofenotipo sindrome mielodisplastica - rivalutazione
• Immunofenotipo mastocitosi
• Immunofenotipo linfomi – stadiazione
• Immunofenotipo delle malattie linfoproliferative croniche
• Ricerca di cloni EPN
• Dosaggio delle flc del siero ed urine (sFLC) mediante nefelometria

Sezione di Biologia Molecolare

Diagnostica molecolare ematologica: diagnostica leucemie acute, leucemia mieloide cronica, leucemia linfoblastica acuta, sindromi mielodisplastiche, sindromi mieloproliferative e  linfomi  a fini diagnostici, terapeutici, prognostici e di follow-up

Tecniche

• Isolamento di sottopopolazioni cellulari da sangue venoso periferico e midollare.
• Estrazione e conservazione di DNA e RNA.
• Estrazione di DNA e RNA da prelievi di midollo osseo e sangue periferico.
• PCR e RT-PCR qualitativa e quantitativa (RQ-PCR).
• High Resolution Melting.
• Sequenziamento capillare.
• Sequenziamento di seconda generazione.
• Colture cellulari.

Attività diagnostica

• Ricerca e determinazione quantitativa della mutazione JAK2 V617F, ricerca delle mutazioni dell’esone 12 di JAK2, dell’esone 10 di MPL e dell’esone 9 di CALR nella diagnosi e nel follow-up delle neoplasie mieloidi.
• Ricerca e determinazione quantitativa della mutazione MYD88 L265P nella macroglobulinemia di Waldenström accertata o sospetta.
• Ricerca delle traslocazioni di BCR-ABL t(9;22) nella Leucemia Mieloide Cronica e nella Leucemia Linfoblastica Acuta
• Ricerca delle seguenti traslocazioni nelle leucemie acute:
• Ricerca della traslocazione  t(8; 21), che coinvolge i geni AML1e ETO;
• Alterazioni del cromosoma 16 che coinvolgono i geni CBFbeMYH11;
• Ricerca della traslocazione t(15;17), che coinvolge i geni PML e RARa
• Ricerca della mutazione nel gene CEBPA; 
• Ricerca della mutazione nel gene nel gene NPM1; 
• Ricerca della mutazione nel gene nel gene FLT3; 
• Ricerca della mutazione nel gene nei geni IDH1/IDH2; 
• Valutazione dell’espressione di